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体视荧光显微镜在拟南芥研究中的应用

拟南芥(Arabidopsis thaliana)作为一种小型的模式植物,已经成为植物生物学研究的明星。它的小型体型、短生命周期以及相对简单的基因组结构使其成为了理想的研究对象。在拟南芥的研究中,体视荧光显微镜发挥着关键作用,它不仅帮助科学家观察植物细胞和组织的内部结构,还提供了机会深入了解植物的发育、生长和响应环境的过程。本文将探讨体视荧光显微镜在拟南芥研究中的应用,包括其在基因表达分析和信号传导通路等研究中的重要性。

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01

拟南芥:理想的模式生物

拟南芥是一种十字花科(Brassicaceae)植物,生长于中东地区,尤其是在地中海沿岸地区。它的小型体型、快速生长和短生命周期(大约6周)使其成为了理想的模式植物。此外,拟南芥的基因组已经完全测序,拥有约2.8亿个碱基对,包含五个染色体。这使得研究人员可以轻松地对其基因进行编辑和研究。

拟南芥的适应性也使其成为了研究生态学的重要对象。它能够在不同的环境条件下生长,从而有助于研究植物的生态适应性。另外,拟南芥的株型和花期也非常多样,为科学家提供了研究多种生物学过程的机会,从基因表达到生长模式,再到抵抗逆境的分子机制。


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02

体视荧光显微镜:探索植物细胞和组织的内部结构
体视荧光显微镜是一种高级显微镜技术,它利用荧光信号来实现高分辨率的三维成像,使研究人员能够深入探究植物细胞和组织的内部结构。在拟南芥研究中,这项技术具有关键意义,因为它提供了独特的能力来观察细胞、亚细胞结构和蛋白质的分布,有助于揭示植物的生长和发育过程。


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03

基因表达分析

体视荧光显微镜也在拟南芥的基因表达分析中发挥着关键作用。通过荧光标记的报告基因或蛋白质标记技术,科学家可以可视化和定量分析不同基因的表达模式,用于蛋白质在活细胞中的准确定位及动态变化观察(荧光蛋白表达、亚细胞定位)。
荧光蛋白表达:将荧光标记的表达载体(如GFP或RFP)引入转基因植株,使目标基因的表达能够可视化。研究人员可以使用体视显微镜观察这些荧光标记的植株,以了解基因在不同生长条件下的表达。
亚细胞定位:通过将荧光标记的蛋白质表达在不同亚细胞结构中,体视荧光显微镜可以帮助研究人员观察这些蛋白质在细胞内的定位,如核内、叶绿体、线粒体或高尔基体。


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MAP65-1是一种微管结合蛋白,它在植物细胞中发挥重要作用,有助于微管的稳定和组织结构的维持。通过观察拟南芥叶片表皮细胞、保卫细胞、下胚轴和根部细胞中微管骨架的分布情况,可以使用MAP65-1来推断目的基因是否存在或其功能是否受到调控。
这些方法允许科学家深入研究特定基因的功能,以及这些基因在不同环境条件下的调控和相互作用。

04

信号传导通路研究

拟南芥在研究植物信号传导通路时也是一个强大的工具。通过引入荧光标记的信号分子或蛋白质,研究人员可以实时监测信号传导的过程。一些应用场景包括:

激素信号传导:通过将荧光标记的植物激素受体引入转基因拟南芥,可以观察激素信号的传递和反应,如生长素和蓝光反应。

逆境应答:研究人员可以通过荧光标记蛋白质来观察植物在逆境条件下的生理和分子响应,如盐胁迫、干旱和病原体感染。


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体视荧光显微镜对植物的 Ca2+ 信号 1 进行实时成像


体视荧光显微镜在拟南芥中的信号传导通路研究中也发挥关键作用。通过将荧光蛋白引入到信号传导通路的不同蛋白质组件中,研究人员可以跟踪信号传导过程中的蛋白质相互作用和定位。这有助于解析信号传导通路中的分子机制,从而更深入地了解植物生长、发育和应对外部刺激的过程。

05

蛋白质相互作用和构象研究


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体视荧光显微镜还可用于研究拟南芥中蛋白质的定位和构象变化。通过标记不同亚细胞结构或细胞器中的蛋白质,研究人员可以观察这些蛋白质的定位,以了解它们在细胞内的位置。
荧光共振能量转移(FRET)是用于量化分子动力学的有用工具,例如蛋白质间相互作用、蛋白质-DNA相互作用和蛋白质构象变化。FRET成像通常使用GFP(绿色荧光蛋白)的衍生物,特别是CFP和YFP(分别为青色和黄色荧光蛋白),这些衍生物通过分子生物学方法被分别附加到感兴趣的蛋白质上。然后用荧光激发CFP分子。一旦感兴趣的蛋白质在空间上互相靠近(<20纳米),CFP就会作为供体通过发射光的形式将能量传递给作为受体的YFP。研究人员就会观察到从CFP发出的蓝色荧光变为从YFP发出的黄色荧光。

附件: 

体视荧光显微镜HSZ700

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Hsz700系列体视荧光显微镜采用伽利略光学系统,人性化设计提高了日常应用过程中的效率和质量,LED荧光双光路照明设计,性能优越,广泛应用于动物的组织成像、线虫的鉴定筛选、果蝇分类、荧光幼虫及麻醉成虫的筛选以及斑马鱼和小鼠的鉴定、胚胎观察及转基因植物如拟南芥等研究。

性能特点

1. 采用伽利略光学系统7:1的大变焦比率

2. 双光路荧光集成模块化设计,专利产品,荧光通道一键切换,快速相应;

3. 大功率LED荧光光源,使用寿命长,人工维护成本低

4. 开关响应时间lms, 无需预热即开即用,亮度支持即时控制,无极调节

5. 只需通过转盘即可轻松实现不同通道之间的切换,可搭配多至四组滤色片,满足不同领域的荧光检测

光学系统

伽利略光学系统

变倍比

7:1 (0.8x5.6x)

变倍体

·变焦驱动:水平旋钮系统

·每一放大倍数处的点停定位机构:可开关

·放大倍数刻度:0.811.251.622.53.2455.6

·物镜固定:螺丝固定无铅

物镜

复消色差物镜DFPLAPO1x-4     0.10     81mm

半复消色差物镜DFPL2x-4       0.20     33.5mm(选配)

观察筒

·铰链式三目观察镜筒,30度倾斜,全部观察筒无铅,瞳间距调节范围50-76mm,提供目镜箝位钮

·光路选择:目镜/相机口=100/00/100

目镜

·10X 视场数(FN22 无铅

荧光附件
HSZ700

标配2个荧光通道,最多可配置4个荧光通道,旋钮式荧光切换方式,12V3A电源适配器,另外配有荧光挡板

光源

标配UBG 210W大功率LED光源,寿命30000小时以上

荧光通道

荧光激发通道

参数

CFP通道带通 I

Ex436/20nm;Em480/30nm

FRET通道带通F

Ex436/20nm;Em535/30nm

荧光滤光片组可根据客户实际需求优化调整,具体请咨询本公司

电源箱

亮度连续可调,可数显强度INPUT:DC12VOUTPUT:DC 5V

相机接口

1x接口, 

底座

标准透射底座

框架安装:安装直径76mm,旋钮旋转张力调节,调焦距离120mm

载物盘:专用玻璃盘,直径100mm

光源:透射照明:LED,反射照明:LED,平均LED寿命:10000小时,输入功率:100--240V50/60Hz10W

额定电压/电流

AC  100 240V  50/60Hz  0.4 A


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