传统的光学显微镜的原理

在这条光路中，只有焦平面上的哪种光才能通过探针针孔。来自焦平面外区域的光在探针针孔平面上散焦，不能通过针孔。因此，北京非观测点为黑色，对比度增强，成像清晰。由于照明针孔和探针针孔相对于物镜的焦平面是共轭的，所以焦平面上的点不会在探针针孔处成像，即共焦。用激光作为光源，扫描样品。在此过程中，激光共聚焦金相显微镜通过两次聚焦形成。

传统的重庆光学显微镜实际上是场光源。由于光的散射，样品上的每一点在观察的视野中同时被照射和成像。入射光照射到整个细胞的一定厚度，焦平面外的反射光也可以通过物镜成像，降低了图像的信噪比，影响了图像的清晰度和分辨率。

重庆光电显微镜3.png

另外，传统的正面光学金相显微镜只能对局部零件进行平面成像，而LSCM已经脱离了这种模式。以激光束为光源，激光束通过照明针孔反射到物镜上，聚焦在样品上，扫描样品焦平面上的每一点。

然后，激发的荧光通过原来的入射光路径直接返回分光镜，检测针孔时先聚焦，聚焦后的光被光电倍增管检测采集，并将信号传输到计算机，在彩色显示器上显示图像。

在现代共焦显微镜中，图像可以由PMT输出，也可以由数字CCD摄像机采集，直接由计算机图像系统处理，以高分辨率视频显示，所有数据都可以存储在硬盘上。

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