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光电荧光显微镜样品制作要求(1) 幻灯片 重庆光电荧光显微镜滑块的厚度应介于0.8和1.2 mm之间。如果玻片太厚,一方面可以吸收更多的光,另一方面也不能使激发光聚集在试样上。载玻片必须光滑,厚度均匀,无明显的自发荧光。有时需要石英玻璃载玻片。 (2) 玻璃罩 盖玻璃厚度约0.17mm,光滑光滑。为了增强激发光,还可以使用干涉罩玻璃。这是一种特殊的覆盖玻璃,上面有几层物质(如氟化镁),对不同波长的光有不同的干扰效果。它可以使荧光顺利通过,而反射的激发光可以激发样品。 (3) 样品 组织切片或其他标本不宜太厚。如果太厚,大部分激发光在试样的下部被消耗,而物镜直接观察到的上部则没有完全激发。此外,细胞重叠或杂质掩蔽也可能影响判断。 (4) 安装剂 甘油常用作贴膜剂。必须无色透明,无自发荧光。pH值为8.5~9.5时,荧光亮度较亮,不易迅速褪色。因此,通常使用甘油和0.5mol/l的pH值为9.0-9.5的碳酸盐缓冲溶液作为贴片剂。 (5) 镜面油 一般情况下,在用暗场荧光显微镜和油镜观察标本时,必须使用镜面油。好使用专用的非荧光镜片油,或上述甘油。也可以使用液体石蜡,但折射率较低,对图像质量影响较小。 |
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